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定量PCR儀常見疑難問題解答

更新時(shí)間:2016-07-27瀏覽:3391次
   1.使用定量PCR儀做熒光標(biāo)記方法,如何設(shè)定淬滅基團(tuán)?
  在7300/7500定量PCR儀操作軟件上,定量PCR儀做報(bào)告基團(tuán),淬滅基團(tuán)選擇“None”。
  2.定量PCR儀樣品的升降溫速率是多少?
  標(biāo)準(zhǔn)模式:1.6℃/s升溫,1.6℃/s降溫;
  仿真模式:0.8℃/s升溫,1.6℃/s降溫;
  快速模式:3.5℃/s升溫,3.5℃/s降溫。
  3.定量PCR儀是否可以做多重定量?
  可以,軟件提供多組分算法,用于校正光譜交叉,從而保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。
  4.定量PCR儀快速反應(yīng)體系是多大?
  定量PCR儀快速模塊支持反應(yīng)體系為10µl-30µl。
  5.定量PCR儀上加入每個(gè)反應(yīng)樣本的量是多少?
  反應(yīng)體系中推薦的模版量的范圍是10-100ng gDNA/cDNA每孔。
  6.定量PCR儀上普通模式和快速模式的數(shù)據(jù)收集是否相同?
  數(shù)據(jù)收集是*相同的,在整個(gè)數(shù)據(jù)收集過程中,收集五個(gè)濾光片的信號,以原始數(shù)據(jù)的方式進(jìn)行顯示。
  7.定量PCR儀可以使用0.2ml PCR反應(yīng)管或者96孔板嗎?
  不可以,定量PCR儀只支持0.1ml PCR反應(yīng)管或者96孔板。
  8.如何監(jiān)控反應(yīng)體系是否有蒸發(fā)?
  查看信號是否在整個(gè)定量PCR儀過程中保持一致。在多組分圖譜界面,選擇單孔,如果Rox信號逐漸增高,代表樣品孔中有蒸發(fā)。
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